Acetyl~CoA ist ein zentraler Metabolit im Stoffwechsel von anaerob und aerob lebenden Prokaryoten. Die biochemisch zentrale Rolle von Acetyl~CoA ist auf die chemischen Reaktivitäten des Methylen-C und des Carbonyl-C zurückzuführen. Vorläufer des Acetyl-CoA-Weges bildeten vermutlich erste C-1-Fixierungswege, die von Prokaryoten im Präkambrium entwickelt wurden.

Homoacetogen Glukose-fermentierende Clostridium thermoaceticum z.B. bilden Acetyl-CoA einerseits durch die Decarboxylierung von Pyruvat mit Pyruvat-Ferredoxin-Oxidoreduktase; andererseits wird es über den Acetyl-CoA-Weg aus CO₂ und H₂ de novo synthetisiert. Ein Schlüsselenzym des Acetyl-CoA-Weges ist die Kohlenmonoxid-Dehydrogenase (CODH).

In der Übung wird der Acetyl-CoA-Weg rekonstruiert und die Rolle der zugehörigen Enzyme diskutiert.